二硫键的位置二硫键的位置及其重要性
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二硫键酶切原理？
对角线电泳是一种经典的二硫键定位分析方法.这种技术包括：（1）胃蛋白酶酶切未经还原的蛋白质；（2）在酸性pH＝6．5的条件下进行第一向电泳,酶解产物肽段将按其大小及电荷的不同而分离；（3）将滤纸暴露在过甲酸（CHOOOH）蒸气中,使二硫键氧化断裂,并进一步氧 化成磺酸基,被氧化的半胱氨酸称为磺基 丙氨酸；（4）将滤纸旋转90.角,在与第一向完全相同 的条件下进行第二向电泳.无二硫键的肽不受酸的作用而在两向电泳中迁移率相等,将位于一条对角线上.那些含二硫键的肽由于第二向电泳时被酸氧化,肽段大小和负电荷发生变化而使迁移率不同,将偏离对角线.肽斑可通过茚三酮显色来确定.将含 磺基丙氨酸的肽段分别取下,进行氨基酸序列分析,推断二硫键的位置.如果蛋白质中存在其他未成二 硫键的半胱氨酸,要先用碘乙酰胺封闭其一SH后再酶解.此外甲硫氨酸和色氨酸也能被氧化,这样可能会增加分析的复杂性.
二硫键与氢键的关系？
二硫键与氢键没有关系，是两类不同的化学键，作用也不相同。
二硫键是由两个一SH，结合后脱去两个H形成，作用是把多肽链连接起来，形成一定空间结构，因此存在于蛋白质内的不同肽链之间。
氢键存在于DNA分子的二条脱氧核苷酸链之间，把相应碱基连接成碱基对，也就形成了DNA的双螺旋结构。
二硫键如何连在肽链上？
两个半胱氨酸的巯基脱氢:-SH HS- ------> -S-S-二硫键的连接应该是不影响普通肽键的.因为一般不把这样连接的两条肽链看作一条。
形成二硫键的实质是两个游离的巯基氧化后形成硫—硫共价键。从化学机理上讲是个自由基反应。 2rsh+o2→rssr+h2o 从反应的机理看，脱掉的氢以离子形态存在，然后进行氧化还原反应与氧结合生成水。这一过程可能有nadp+离子参与。
两个甲硫氨酸之间可以形成二硫键？
二硫键的形成：是两个本身含硫的氨基酸（像半胱氨酸）经过缩合而成的。蛋白质中的二硫键，只能由两个半胱氨酸形成。甲硫氨酸无法形成二硫键
二硫键一定有两个硫吗？
不一定。二硫键只是维持蛋白质低级结构的一种键，更重要的是氢键。而且含有硫的氨基酸也有不少，他们不可能全部形成二硫键。
再者，如果一个蛋白质结构中仅含一个含硫氨基酸，那就更不可能有二硫键了